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定義
正置生物顯微鏡（Ｕｐｒｉｇｈｔ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）是一種光學顯微鏡，其物鏡位于樣本上方，照明系統位于樣本下方。主要觀察透射光下的薄樣本（如組織切片、細胞涂片等），是生物學、醫學、病理學等領域的基礎科研與診斷工具。
核心結構與功能
１． 光學系統
物鏡（核心部件）：
位于樣本上方，通常配備４×、１０×、４０×、１００×（油鏡）等多級放大鏡頭。
數值孔徑（ＮＡ）：決定分辨率（ＮＡ越大，分辨率越高）。
目鏡：
標準為１０×或１５×，與物鏡組合實現總放大倍數（例：４０×物鏡 ＋ １０×目鏡 ＝ ４００×）。
聚光鏡：
位于樣本下方，聚焦光線至樣本，配備孔徑光闌（調節對比度）和視場光闌（減少雜光）。
２． 機械系統
載物臺：
固定玻片，可手動／電動操控Ｘ－Ｙ軸移動（精度達微米級），帶標本夾。
調焦裝置：
粗調焦旋鈕（快速升降） ＋ 微調焦旋鈕（精細對焦，精度約２μｍ）。
物鏡轉換器：
可旋轉切換不同倍數物鏡，保持齊焦（切換后僅需微調）。
３． 照明系統
透射光源：
鹵素燈（色溫接近日光）或ＬＥＤ燈（節能、長壽命），亮度可調。
柯勒照明（Ｋ?ｈｌｅｒ Ｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ）：
標準配置，確保光線均勻、無眩光，提升成像質量。
工作原理
光路路徑：
光源 → 聚光鏡 → 樣本（透射）→ 物鏡 → 目鏡／攝像頭 → 人眼或成像設備。放大與分辨：
物鏡初級放大實像 → 目鏡二次放大虛像。
分辨率極限：≈２００ｎｍ（可見光波長限制），油鏡可提升至≈１４０ｎｍ。
關鍵特點
| 特性 | 說明 |
|---|---|
| 樣本類型 | 需制備為薄切片／涂片（厚度≤１０μｍ），置于載玻片上，加蓋玻片封片。 |
| 成像模式 | 主要支持明場觀察（Ｂｒｉｇｈｔｆｉｅｌｄ），可選配相差、暗場、熒光等模塊擴展功能。 |
| 操作方式 | 觀察時物鏡接近樣本，需避免鏡頭觸碰玻片（高倍鏡工作距離短，油鏡僅０．１ｍｍ）。 |
| 適用場景 | 固定樣本的精細結構觀察（如細胞核、染色體、病原體）。 |
應用領域
醫學診斷：
病理學（組織切片癌變分析）、血液學（血涂片寄生蟲檢測）。
生物學研究：
細胞形態學、微生物鑒定（細菌／真菌）、植物解剖。
教學與培訓：
高校實驗室基礎顯微觀察教學。
工業質檢：
材料表面缺陷、纖維結構分析（需反射光配件）。
正置 ｖｓ． 倒置顯微鏡
| 特性 | 正置顯微鏡 | 倒置顯微鏡 |
|---|---|---|
| 物鏡位置 | 樣本上方 | 樣本下方 |
| 適用樣本 | 薄切片、玻片固定樣本 | 活細胞（培養皿／培養瓶）、厚組織塊 |
| 工作距離 | 較短（高倍鏡易觸玻片） | 較長（可直接觀察培養容器底部） |
| 主要用途 | 病理切片、固定細胞 | 細胞培養、活體觀察 |
技術演進與高端配置
模塊化擴展：
熒光附件：激發塊＋汞燈／ＬＥＤ光源，用于特異性標記（如免疫熒光）。
相差環：觀察未染色活細胞的內部結構。
ＤＩＣ（微分干涉相襯）：提升三維立體感與對比度。
數字化升級：
內置攝像頭 → 實時圖像采集、測量分析軟件（細胞計數、尺寸測量）。
電動化：自動聚焦、載物臺掃描、多視野拼接。
共聚焦兼容：
部分高端正置鏡可升級為激光共聚焦顯微鏡，實現光學切片與３Ｄ重構。
使用注意事項
玻片清潔：避免指紋或灰塵影響成像。
油鏡操作：
滴浸油后輕調避免產生氣泡，使用后立即用二甲苯拭鏡紙清潔油漬。
光源管理：
關閉光源前調至最低亮度，延長燈泡壽命；汞燈需冷卻后重啟。
防震防潮：
放置穩定平臺，存放于干燥環境（避免鏡頭霉變）。
選購要點
| 參數 | 建議 |
|---|---|
| 光學質量 | 物鏡需鍍膜（消色差／平場復消色差），支持齊焦性。 |
| 照明類型 | ＬＥＤ光源優于鹵素燈（低發熱、長壽命）。 |
| 擴展性 | 預留熒光／ＤＩＣ接口，兼容數字化配件。 |
| 品牌與售后 | 尼康、奧林巴斯、蔡司、徠卡等主流品牌，確保維修與校準支持。 |
總結
正置生物顯微鏡是微觀世界觀察的基石設備，以其對固定樣本的高分辨率成像能力，成為生命科學和醫學診斷的必備工具。隨著模塊化與數字化發展，其功能已從基礎形態學拓展至多維動態分析，持續推動科研與臨床的進步。
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