準備實驗室環境：確保實驗室環境干凈整潔，避免污染。準備好所需的試劑、樣本和實驗儀器。

準備ＰＣＲ反應體系：按照實驗方案準備ＰＣＲ反應混合液，包括引物、探針、ＤＮＡ模板、酶和緩沖液等成分。確保反應體系的配比準確無誤。

設置ＰＣＲ程序：根據實驗方案設置ＰＣＲ程序，包括變性、退火和延伸等步驟的溫度和時間參數。確保程序設置正確，以保證ＰＣＲ反應的準確性和穩定性。

加載樣品：將準備好的ＰＣＲ反應混合液加載到ＰＣＲ板中，同時加入負對照和陽性對照樣品。確保每個樣品都有正確標記，并避免交叉污染。

放置ＰＣＲ板：將裝有ＰＣＲ反應混合液的ＰＣＲ板放入實時熒光定量ＰＣＲ分析儀中，確保板的位置正確，避免操作錯誤。

運行ＰＣＲ程序：啟動ＰＣＲ程序，讓實時熒光定量ＰＣＲ分析儀按照設定的程序進行ＰＣＲ反應。實時監測ＰＣＲ反應過程中的熒光信號，記錄數據。

數據分析：分析ＰＣＲ反應的實時熒光數據，生成標準曲線并計算樣品中目標ＤＮＡ的相對含量。根據實驗目的進行數據解讀和結果分析。

清潔和維護：實驗結束后，及時清潔ＰＣＲ板和儀器，避免污染。定期對實時熒光定量ＰＣＲ分析儀進行維護和校準，確保其正常運行。

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